ОПТИМІЗАЦІЯ ВИДІЛЕННЯ ТА ОЧИСТКИ БАКТЕРІОЦИНУ ENTEROCOCCUS ITALICUS OНУ 547 ЗА ДОПОМОГОЮ АНІОНООБМІННОЇ ХРОМАТОГРАФІЇ
DOI:
https://doi.org/10.18524/2307-4663.2025.2(64).339240Ключові слова:
бактеріоцин, Enterococcus italicus, аніонообмінна хроматографія, очищення пептидівАнотація
Мета. Метою роботи була оптимізація виділення та очищення бактеріоцину з E. italicus OНУ 547, який має біотехнологічний потенціал, за допомогою аніонообмінної хроматографії низького тиску.
Методи. Для виділення бактеріоцину з культуральної рідини та його часткового очищення використовували аніонообмінну хроматографію, що здійснювали за допомогою системи BioLogic LP з картриджем Bio-Scale Mini Macro-Prep High Q. Для збільшення виходу бактеріоцину та його чистоти було випробувано протоколи двох крокової та трьох крокової елюції.
Результати. Бактеріоцин з культуральної рідини E. italicus OНУ 547 (320 ВО/мл) було виділено та частково очищено за допомогою аніонообмінної хроматографії з системою низького тиску. Слаболужний водневий потенціал (pH = 8,0) культуральної рідини та рухомої фази був придатним для ефективного зв'язування бактеріоцину з позитивно зарядженим матриксом колонки. Двоступенева процедура елюції (10% та 100% буферу B з 1 M NaCl) призвела до виходу бактеріоцину 4,4%, тоді як триступенева елюція (10%, 50% та 100%) – 5%. Запропоновано спрощену процедуру виділення та очищення бактеріоцинів.
Висновки. Аніонообмінна хроматографія низького тиску з pH 8,0 рухомої фази є ефективною для виділення бактеріоцину безпосередньо з культуральної рідини E. italicus ОНУ 547 та для його часткового очищення. Триступенева процедура елюції з 10%, 50% та 100% 1 M NaCl призводить до вищої чистоти та виходу бактеріоцину.
Посилання
Almeida-Santos AC, Novais C, Peixe L, Freitas AR. Enterococcus spp. as a producer and target of bacteriocins: a double-edged sword in the antimicrobial resistance crisis context. Antibiotics. 2021;10:1215. https://10.3390/antibiotics10101215
Bemena LD, Mohamed LA, Fernandes AM, and Lee BH. Applications of bacteriocins in food, livestock health and medicine. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences. 2014;3:924–949.
De Man JC, Rogosa M, Sharpe ME. A medium for the cultivation of Lactobacilli. Journal Appl. Baсteria. 1960;23(1):130–135.
Zuck R. SOP: anion exchange chromatography of green fluorescent protein (GFP) using the AKTA Pure system [Internet]. The Northeast Biomanufacturing Center and Collaborative, 2016. Available from: https://biomanufacturing.org/uploads/files/125829292942807316-anion-exchange-chromatography-of-green-fluorescent-protein-gfp-using-the-akta-pure-system.pdf
Gaaloul N, Braiek OB, Berjeaud JM, Arthur T, Cavera V, Chikindas M, Hani K, Ghrairi T. Evaluation of antimicrobial activity and safety aspect of Enterococcus italicus GGN10 strain isolated from Tunisian bovine raw milk. Journal of Food Safety. 2014;34:300–311. https://doi.org/10.1111/jfs.12126
H-Kittikun A, Biscola V, El-Ghaish Sh, Jaffrès E, Xavier D, Pillot G, Haertlé T, Chobert J-M, Hwanhlem N. Bacteriocin-producing Enterococcus faecalis KT2W2G isolated from mangrove forests in southern Thailand: Purification, characterization and safety evaluation. Food Control. 2015;54:126–134. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2014.12.037
Hwanhlem N, Chobert J-M, H-Kittikun A. Bacteriocin-producing lactic acid bacteria isolated from mangrove forests in southern Thailand as potential bio-control agents in food: Isolation, screening and optimization. Food Control. 2014;41:202–211. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2014.01.021
Ilyas F, James A, Khan S, Haider S, Ullah S, Darwish G, Taqvi SAHR, Ali R, Younas Q, Rehman A. Multidrug-resistant pathogens in wound infections: a systematic review. Cureus. 2024;16(4):e58760. https://doi.org/10.7759/cureus.58760
Merlich A, Galkin M, Choiset Y, Limanska N, Vasylieva N, Ivanytsia V, Haertlé T. Characterization of the bacteriocin produced by Enterococcus italicus ONU547 isolated from Thai fermented cabbage. Folia Microbiol. 2019;64:535–545. https://doi.org/10.1007/s12223-019-00677-4
Pingitore EV, Salvucci E, Sesma F, and Nader-Macías ME. Different strategies for purification of antimicrobial peptides from lactic acid bacteria (LAB). Communicating Current Research and Educational Topics and Trends in Applied Microbiology. 2007:557–568.
Rakotondraoelina LM, Rakotovao-Ravahatra ZD, Rafaramalala SS, Rakotovao AL, Rasamindrakotroka A. Antibiotic resistance and associated factors with purulent skin infections due to Staphylococcus aureus. Archives of Microbiology and Immunology. 2022;6:289–293. https://doi.org/10.4081/jphia.2023.2307
##submission.downloads##
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2025 A. Г. Мерліч, Н. В. Бачинський, К. С. Петренко, Г. В. Лісютін, В. O. Іваниця
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
Автор передає журналу (університету) на безоплатній основі невиключні права на використання статті (на весь строк дії авторського права починаючи з моменту публікації, розміщення статті на веб-сторінці журналу, в репозитарії відкритого доступу) без одержання прибутку; на відтворення статті чи її частин в електронній формі (включаючи цифрову); виготовлення ії електронних копій для постійного архівного зберігання; виготовлення електронних копій статті для некомерційного розповсюдження; внесення статті до бази даних репозитарію; надання електронних копій статті в доступі мережі інтернет.
Автор гарантує, що у статті не використовувалися статті або авторські права, які належать третім особам; гарантує, що на момент розміщення статті на веб-сторінці, в репозитарії ОНУ лише йому належать виключні майнові права на статтю, що розміщується; майнові права на статтю ні повністю, ні в частині нікому не передано (не відчуджено), майнові права на статтю ні повністю, ні в частині не є предметом застави, судового спору або претензій з боку третіх осіб.
Автор зберігає за собою право використовувати самостійно чи передавати права на використання статті третім особам.
Автор надає журналу право на використання статті такими способами:
переробляти, адаптувати або іншим чином змінювати її за погодженням з автором; перекладати статтю у випадку, коли стаття викладена мовою іншою, ніж мова, якою передбачена публікація у виданні. Якщо журнал виявить бажання використовувати статтю іншими способами: перекладати, розміщувати повністю або частково у мережі інтернет, публікувати статтю в інших, в тому числі іноземних виданнях, включати статтю як складову частину до інших збірників, антологій, енциклопедій тощо, умови оформлюються додатковою угодою.
Автор підтверджує, що він є автором (співавтором) цієї статті; авторські права на дану статтю не передані іншому видавцю; дана стаття не була раніше опублікована у будь-якому іншому виданні до публікації її журналом.
Публікація праць в Журналі здійснюється на некомерційній основі. Комісійна плата за оформлення статті не стягується.
