DOI: https://doi.org/10.18524/2307-4663.2014.3(27).48283

УЧАСТЬ WAAL ЛІГА З БАКТЕРІЙ YERSINIA ENTEROCOLITICA O:3 ТА O:8 В ФОРМУВАННІ РЕЗИСТЕНТНОСТІ ДО СИРОВАТКИ КРОВІ

Ю. І. Шевченко, В. К. Позур, M. Скурник

Анотація


Метою даної роботи було дослідження участі WaaL лігаз в біосинтезі ліпополісахариду (ЛПС) бактерій Yersinia enterocolitica серотипів О:3 та О:8; їх ролі в формуванні фенотипу ЛПС та резистентності waaL-мутантів до сироватки крові. WaaL лігази каталізують приєднання О-антигену (O-Ag) та зовнішнього полісахаридного кору (OC) до ліпіду А в процесі біосинтезу ліпополісахариду грамнегативних бактерій. В геномі бактерій Y. enterocolitica було ідентифіковано три гени лігаз, які були названі waaLOS, waaLPS та waaLXS. Методи. Нокаутні мутанти по генам лігаз waaL були створені шляхом обміну алелями. Візуалізація фенотипів ЛПС створених мутантів відбувалась шляхом забарвлення сріблом гелю DOC-PAGE та імуноблоту з специфічними моноклональними антитілами до кору та О-полісахариду. Оцінювали виживання бактерій в нормальній сироватці крові (присутні класичний, лектиновий та альтернативний шлях активації комплементу) та обробленій EGTA (тільки альтернативний шлях). Результати. Отримані результати підтверджують участь WaaL лігаз в синтезі належної молекули ЛПС та відіграють важливу роль в формуванні резистентності до бактерицидної дії сироватки крові. Висновки. Лігази ЛПС бактерій демонструють низьку субстрату специфічність. За даних умов участь WaaLOS лігази в лігуванні OC та ОПС на ліпід А є істотнішою ніж WaaLPS.


Ключові слова


WaaL лігаза; ліпополісахарид; Yersinia enterocolitica; резистентність сироватки

Повний текст:

PDF (English)

Посилання


Pinta, E., et al., Identification of three oligo-/polysaccharide-specific ligases in Yersinia enterocolitica. Mol. Microbiol., 2012. 83(1): P. 125–36.

Biedzka-Sarek M., R. Venho and M. Skurnik, Role of YadA, Ail, and Lipopolysaccharide in Serum Resistance of Yersinia enterocolitica Serotype O:3. Infect Immun, 2005. 73(4): P. 2232–44.

Xu L. et al., Characterization of Edwardsiella tarda waaL: roles in lipopolysaccharide biosynthesis, stress adaptation, and virulence toward fish. Arch. Microbiol., 2010. 192(12): P. 1039–47.

Wachter E., and V. Brade. Influence of surface modulations by enzymes and monoclonal antibodies on alternative complement pathway activation by Yersinia enterocolitica. Infect. Immun., 1989. 57: P. 1984–1989.

Skurnik M., R. Venho, J.-A. Bengoechea and I. Moriyo´n. The lipopolysaccharide outer core of Yersinia enterocoliticaserotype O:3 is required for virulence and plays a role in outer membrane integrity. Mol. Microbiol., 1999. 31: P. 1443–1462.

Skurnik M. Lack of correlation between the presence of plasmids and fimbriae in Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis. J. Appl. Bacteriol., 1984. 56: P. 355–363.

Portnoy D.A., Moseley S.L. and Falkow S. Characterization of plasmids and plasmid-associated determinants of Yersinia enterocolitica pathogenesis. Infect. Immun, 1981. 31: P. 775–782.

Zhang L., Radziejewska-Lebrecht J., Krajewska-Pietrasik D., Toivanen P. and Skurnik M. Molecular and chemical characterization of the lipopolysaccharide O-antigen and its role in the virulence of Yersinia enterocolitica serotype O:8. Mol. Microbiol, 1997. 23: P. 63–75.

Babic A., Guerout A.M. and Mazel D. Construction of an improved RP4 (RK2)-based conjugative system. Res Microbiol, 2008. 159: P. 545–549.

Wilson K.J., Sessitsch A., Corbo J.C., Giller K.E., Akkermans A.D. and Jefferson R.A. beta-Glucuronidase (GUS) transposons for ecological and genetic studies of rhizobia and other gram-negative bacteria. Microbiology, 1995. 141 (Part 7): P. 1691–1705.


Пристатейна бібліографія ГОСТ






Creative Commons License
Ця робота ліцензована Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

ISSN 2076-0558 (Print); 2307-4663 (Online)

DOI 10.18524/2307-4663