АКТИВНІСТЬ І КІНЕТИЧНІ ВЛАСТИВОСТІ СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗИ СУЛЬФАТВІДНОВЛЮВАЛЬНИХ БАКТЕРІЙ DESULFOVIBRIO PIGER VIB-7 ТА DESULFOMICROBIUM SP. ROD-9
DOI:
https://doi.org/10.18524/2307-4663.2014.4(28).48409Ключові слова:
сульфатвідновлювальні бактерії, активність супероксиддисмутази, кінетичні властивостіАнотація
Метою роботи було дослідження активності супероксиддисмутази безклітинних екстрактів Desulfovibrio piger Vib-7 і Desulfomicrobium sp. Rod-9, виділених з товстого кишечника людини, і проведення аналізу кінетичних властивостей ензиматичної реакції. Методи. Використано мікробіологічні, біохімічні, біофізичні методи досліджень і методи статистичної обробки результатів. Результати. Досліджено питому активність супероксиддисмутази сульфатвідновлювальних бактерій. Показано вплив різної температури, рН та концентрації субстрату на активність досліджуваного ензиму. На основі експериментальних даних, проведено аналіз кінетичних властивостей супероксиддисмутази досліджуваних бактеріальних штамів. Розраховано початкову (миттєву) швидкість реакції (V0), максимальну швидкість ензиматичної реакції (Vmax), і константи Міхаеліса (Км) реакції супероксиддисмутази для обох штамів. Висновок. Кінетичні параметри реакції супероксиддисмутази обох штамів бактерій статистично не відрізнялися. Отримані дані про вплив оптимуму рН (7,5–9,5) на активність ферменту узгоджуються зі значенням рН у товстому кишечнику людини. Ці умови забезпечують інтенсивний ріст бактеріальних штамів, процес дисиміляційного відновлення сульфату і, відповідно, накопичення гідроген сульфіду у кишечнику.
Посилання
Bailey N.T.J. Statistical Methods in Biology. Cambridge University Press. – 1995. – 255 p.
Barton L.L., Hamilton W.A. Sulphate-Reducing Bacteria. Environmental and Engineered Systems. Cambridge: Cambridge University Pres. – 2010. – 553 p.
Beavchamp C., Fridovich I. Superoxide dismutase: improved assays and an assay apliciable to acrylamide gels // Anal. Biochem. – 1971. – 44(1). – P. 276–287.
Brioukhanov A.L., Thauer R.K., Netrusov A.I. Catalase and Superoxide Dismutase in the Cells of Strictly Anaerobic Microorganisms // Microbiology. –2002. – 71(3).– P. 330–335.
Brioukhanov A.L., Netrusov A.I. Catalase and Superoxide Dismutase: Distribution, Properties, and Physiological Role in Cells of Strict Anaerobes // Biochemistry. – 2004. – 69(9). – P. 949–962.
Dannenberg S., Kroder M., Dilling W., Cypionka H. Oxidation of H2, organic compounds and inorganic sulfur compounds coupled to reduction of O2 or nitrate by sulfate-reducing bacteria // Arch. Microbiol. – 1992. –158. – P. 93–99.
Fridovich I. Superoxide Radical and Superoxide Dismutases // Annu. Rev. Biochem. – 1995. – 64. – P. 97–112.
Gudelj M., Fruhwirth G.O., Paar A. et al. A catalase-peroxidase from a newly isolated thermoalkaliphilic Bacillus sp. with potential for the treatment of textile bleaching effluents // Extremophiles. – 2001. – 5.– P. 423–429.
Ito T., Nielsen J.L., Okabe S., Watanabe Y., Nielsen P.H. Phylogenetic identification and substrate uptake patterns of sulfatereducing bacteria inhabiting an oxic-anoxic sewer biofilm determined by combining microautoradiography and FISH // Appl. Environ. Microbiol. – 2002. – 68.– P. 356–364.
Keleti T. Basic Enzyme Kinetics. – Akademiai Kiado. – 1988. – 422 p.
Krekeler D., Teske A., and Cypionka H. Strategies of sulfate-reducing bacteria to escape oxygen stress in a cyanobacterial mat // FEMS Microbiol. Ecol. – 1998. – 25(2).– P. 89–96.
Kushkevych I.V. Sulfate-reducing bacteria of the human intestine. II. The role in the diseases development // Sci. Int. J. Biological studies/Studia Biologica. – 2012. – 6 (2).– P. 221–250. (in Ukrainian)
Kushkevych I.V. Identification of sulfate-reducing bacteria strains of human large intestine // Sci. Int. J. Biological studies/Studia Biologica. – 2013. – 7(3). – P. 115–124.
Kushkevych I.V., Bartoš M., Bartošová L. Sequence analysis of the 16S rRNA gene of sulfate-reducing bacteria isolated from human intestine // Int. J. Curr. Microbiol. Appl. Sci. – 2014. – 3(2). – P. 239–248.
Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein determination with the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. – 1951. – 193. – P. 265–275.
Sies H. Strategies of antioxidant defense // Eur. J. Biochem. – 1993. – 215. – P. 213–219.
##submission.downloads##
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2014 Мікробіологія і біотехнологія
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
Автор передає журналу (університету) на безоплатній основі невиключні права на використання статті (на весь строк дії авторського права починаючи з моменту публікації, розміщення статті на веб-сторінці журналу, в репозитарії відкритого доступу) без одержання прибутку; на відтворення статті чи її частин в електронній формі (включаючи цифрову); виготовлення ії електронних копій для постійного архівного зберігання; виготовлення електронних копій статті для некомерційного розповсюдження; внесення статті до бази даних репозитарію; надання електронних копій статті в доступі мережі інтернет.
Автор гарантує, що у статті не використовувалися статті або авторські права, які належать третім особам; гарантує, що на момент розміщення статті на веб-сторінці, в репозитарії ОНУ лише йому належать виключні майнові права на статтю, що розміщується; майнові права на статтю ні повністю, ні в частині нікому не передано (не відчуджено), майнові права на статтю ні повністю, ні в частині не є предметом застави, судового спору або претензій з боку третіх осіб.
Автор зберігає за собою право використовувати самостійно чи передавати права на використання статті третім особам.
Автор надає журналу право на використання статті такими способами:
переробляти, адаптувати або іншим чином змінювати її за погодженням з автором; перекладати статтю у випадку, коли стаття викладена мовою іншою, ніж мова, якою передбачена публікація у виданні. Якщо журнал виявить бажання використовувати статтю іншими способами: перекладати, розміщувати повністю або частково у мережі інтернет, публікувати статтю в інших, в тому числі іноземних виданнях, включати статтю як складову частину до інших збірників, антологій, енциклопедій тощо, умови оформлюються додатковою угодою.
Автор підтверджує, що він є автором (співавтором) цієї статті; авторські права на дану статтю не передані іншому видавцю; дана стаття не була раніше опублікована у будь-якому іншому виданні до публікації її журналом.
Публікація праць в Журналі здійснюється на некомерційній основі. Комісійна плата за оформлення статті не стягується.