МУКОАДГЕЗИВНИЙ ГЕЛЬ З ІММОБІЛІЗОВАНИМИ ЛІЗОЦИМОМ І КВЕРЦЕТИНОМ

І. І. Романовська, А. П. Левицький, С. С. Декіна, А. М. Овсепян

Анотація


Мета. Розробити мукоадгезивний гель з сумісно іммобілізованими лізоцимом і кверцетином, дослідити біохімічні, фізико-хімічні і біологічні властивості комплексного препарату. Методи. Бактеріолітичну активність лізоциму визначали турбідиметрично, використовуючи як субстрат Micrococcus lysodeikticus АТСС № 4698. Вміст білка визначали за Лоурі-Хартрі, кверцетину – із застосуванням хлориду цирконію (IV) спектрофотометрично. Іммобілізацію здійснювали методом включення в гель. Лікувально-профілактичну дію комплексного гелю досліджували на щурах, у яких відтворювали гінгівіт за допомогою індометацину. Результати. З використанням натрієвої солі карбоксиметилцелюлози як матриці здійснено сумісну іммобілізацію лізоциму і кверцетину. Показано, що за масових відношень лізоцим: кверцетин: матриця (1: 0,4: 6) спостерігається повне включення лізоциму, кверцетину і збереження бактеріолітичної активності ферменту. Отриманий гель має високі мукоадгезивні властивості (сила адгезії 6000 Па), пролонговану дію: час повного виходу ензиму і кверцетину з гелю становили 180 і 75 хв, відповідно. Іммобілізований лізоцим активний в широкому діапазоні значень рН, стабільний в кислому середовищі і при зберіганні. Застосування орального гелю з лізоцимом і кверцетином приводить показники запалення до норми. Висновки. Сумісна іммобілізація лізоциму та кверцетину в натрієву сіль карбоксиметилцелюлози не впливає на біохімічні властивості ферменту. Отриманий мукоадгезивний гель з іммобілізованими лізоцимом і кверцетином є препаратом з комплексною біологічною активністю, і чинить антимікробну і протизапальну дії.


Ключові слова


лізоцим; кверцетин; сумісна іммобілізація; мукоадгезія; біохімічні і біологічні властивості

Повний текст:

PDF

Посилання


Lee, J.W., Park Robinson, J. H. Bioadhesive-based dosage forms: the next generation //Journal of Pharmaceutical Sciences. – 2000, V. 89. – С. 850–866.

Харенко Е. А., Ларионова Н. И., Демина Н. Б. Мукоадгезивные лекарственные формы (обзор) // Химико-фармацевтический журнал –2009. – Т. 43, № 7. – С. 17–24.

Lu Z., Zhang J., Ma Y. Biomimetic mineralization of calcium carbonate/ carboxymethylcellulose microspheres for lysozyme immobilization // Materials Science and Engineering. – 2012. – V. 32, № 7. – P. 1982–1987.

Pirasa A. M., Maisettab G., Sandreschi S. Preparation, physical–chemical and biological characterization of chitosan nanoparticles loaded with lysozyme // International Journal of Biological Macromolecules. – 2014. – V. 67. – P. 124–131.

Anirudhan T. S., Rauf T. A. Lysozyme immobilization via adsorption process using sulphonic acid functionalized silane grafted copolymer // Colloids and surfaces B: Biointerfaces. – 2013. – V. 107. – P. 1–10.

Takahashi D., Hamada T., Izumi T. Immobilization of lysozyme on poly (N-isopropyl acrylamide)/2-hydroxyethyl methacrylate copolymer core–shell gel beads // Polymer Bulletin. – 2012. – V. 68, № 6. – Р. 1777–1788.

Kuijpersa A. J., Wachemb P. B., Luyn M. J. In vivo and in vitro release of lysozyme from cross-linked gelatin hydrogels: a model system for the delivery of antibacterial proteins from prosthetic heart valves // Journal of Controlled Release. – 2000. – V. 67, № 1–2. – P. 323–336.

Декина С.С., Романовская И.И., Овсепян А.М., Молодая А.Л., Пашкин И. И. Иммобилизация лизоцима в криогель поливинилового спирта // Biotechnologia Acta – 2014. – V. 7, № 3. – Р. 69–73.

Левицкий А. П. Лизоцим вместо антибиотиков. – Одесса: КП ОГТ, 2005. – 74 с.

Hartree E. F. Determination of protein: a modification of the Lowry method, that gives a linear photometric response // Analytical Biochemistry. – 1972. – V. 48, № 2. – P. 422–427.

Ogura H., Shikiba Y., Yamazaki Y. Quantitative analysis of flavonoids // J. of Pharmaceutical Sciences – 1968. – V. 57, № 4. – P. 705–706.

Kharenko E. A., Larionova N. I., Demina N. B. Mucoadhesive drug deliversystems: quantitative assessment of interaction between synthetic and natural polymer films and mucosa // Pharmaceutical Chemistry Journal – 2008. – V. 42, № 7. – Р. 392–399.

Radi Z. A., Khan N. K. Effects of cyclooxygenase inhibition on the gastrointestinal tract // Exper. Toxicol. Pathology. – 2006. – V. 58, № 1. – P. 163–173.

Левицкий А. П., Деньга О. В., Макаренко О. А., Демьяненко С.А., Россаханова Л. Н., Кнава О. Э. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости (методические рекомендации). – Одесса: КП ОГТ, 2010. – 16 с.

Левицкий А. П., Макаренко О. А., Селиванская И.А., Россаханова Л.Н., Деньга О.В., Почтарь В.Н., Скидан К.В., Гончарук С. В. Ферментативный метод определения дисбиоза полости рта для скрининга про- и пребиотиков (методические рекомендации). – К.: ГФЦ МЗУ, 2007. – 26 с.

Патент на корисну модель № 43140, Україна, МПК (2009) G01N 33/48 «Спосіб оцінки ступеня дисбіозу (дисбактеріозу) органів і тканин» / Левицький А. П., Деньга О. В., Селіванська І.О., Макаренко О.А., Дем’яненко С.О., Цісельський Ю. В. Заявка № U200815092 від 26.12.2008. Опубл. 10.08.2009. Бюл. № 15.

Лапач С. Н., Чубенко А. В., Бабич П. Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel. – К.: Морион, 2000. – 320 с.


Пристатейна бібліографія ГОСТ






DOI: https://doi.org/10.18524/2307-4663.2015.3(31).53650

Посилання

  • Поки немає зовнішніх посилань.


Creative Commons License
Ця робота ліцензована Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

ISSN 2076-0558 (Print); 2307-4663 (Online)